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PCR 熒光(guāng)探針技(jì)術(shù)

發布日(rì)期:2023-08-24浏覽次數(shù):4948标簽:

      聚合酶鏈式反應(PCR)是(shì)一(yī)種用(yòng)于放(f‌αα₽àng)大(dà)擴增特定的(de)DNA片段的(de)分↓ ≥'(fēn)子(zǐ)生(shēng)物(wù)學技(jì)術(shβ&≥ù),通(tōng)過對(duì)基因的(de)選擇性片₹☆段進行(xíng)體(tǐ)外(wài)高(gāo)效擴增,從(cóng)而實現(xiàn)¥♣≤目的(de)基因的(de)檢測。

      PCR-熒光(guāng)探針法的(de)主要(yào)原理(lǐ)是(§&✘shì):PCR擴增時(shí)在加入一(yī)對(duì)引物(wù)的(de)同時(shí≈'✔)加入一(yī)個(gè)特異性的(de)©​δ熒光(guāng)探針,該探針為(wèi)一(yī)寡核苷酸,兩✔¥端分(fēn)别标記一(yī)個(gè)報(bào)告熒光(guāng)基團和(hé¥₹$>)一(yī)個(gè)淬滅熒光(guān→​♠γg)基團。探針完整時(shí),報(bào)告基團✔ $'發射的(de)熒光(guāng)信号被淬滅基團吸收;随著(zhe)PC≤©R擴增,Taq酶的(de)5'端-3'端外(wài)↔ Ω‌切酶活性将探針酶切降解,使報(bào)告熒光(guāng)基團和(hé)淬滅熒™&光(guāng)基團分(fēn)離(lí),♠≤從(cóng)而熒光(guāng)監測系統可(kě)σ♥✔ 接收到(dào)熒光(guāng)信号,即每擴增一(yī)條DNA鏈,就(jiù)有(yǒu)™§一(yī)個(gè)熒光(guāng)分(fēn)子(zǐ)形成,實現(xiàn)了(le >×)熒光(guāng)信号的(de)累積與PCR産物(wù)形αφ↓α成完全同步。

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