你(nǐ)應知(zhī)道(dào)的(de)新型冠狀病毒2019-☆λαnCoV實驗室檢測內(nèi)容都(dōu)在這(≥♥±zhè)了(le)

血液學檢查

病毒感染相(xiàng)關的(de)血液學檢查主要(yào)包括血常規、血生(shēn×→≠g)化(huà)以及其他(tā)針對(duì)性的(de)檢測項目，相(xiàng)關指标為(wè∞σi)臨床常用(yòng)的(de)病毒感染診斷指标，為(wèi)疾÷₩<病的(de)輔助診斷提供依據。

1、血常規

血常規中的(de)許多(duō)項具體(tǐ)指标都(dōu)是(shì)一(yī)些(xiē)常​¶≤ 用(yòng)的(de)敏感指标，對(duì)機(jī)體(tǐ)內(nèi)許φ ←α多(duō)病理(lǐ)改變都(dōu)有(yǒu)敏感反映，其中又(yòu)以白(bái)‌Ω細胞計(jì)數(shù)、紅(hóng)細胞計(​÷Ωεjì)數(shù)、血紅(hóng)蛋白(bái)和(hé)血小(xiǎo)闆最具有(yǒ≠•>γu)診斷參考價值，許多(duō)患者在病因不(bù)明(míng)時(shí)可(k§γ€≠ě)以做(zuò)血常規檢查對(duì)其進行(xíng)輔助©♥£≥診斷。此外(wài)，血常規檢查還(hái)是(shì)觀察治療效果、用(yònε​£≤g)藥或停藥、繼續治療或停止治療、疾病複發或痊愈的(de)常用(yòng)指标™←‍。

NCOVID19肺炎發病初期白(bái)細胞總數(shù)大(dà)部分(fēn)降β φ×低(dī)或正常，淋巴細胞計(jì)數(shù)減少(shǎo)，單核細胞增加或 ♣正常。淋巴細胞絕對(duì)值如(rú)果小(xiǎo)于0.8×109/L，一(yī)般建議(y©✔ì)3 d後複查血液常規變化(huà)。根據鐘(zhōng)南✔×δ(nán)山(shān)院士的(de)最新研究發現(βπ§xiàn)82.1％的(de)患者淋巴細×♥≤胞減少(shǎo)、36.2％的(de)患者血小(xiǎo)闆減少(¶≤∞shǎo)，總體(tǐ)患者中觀察到(dào)白(bái)細胞減少(shǎo)的(de)比例約占3ε¶<3.7％，嚴重病例白(bái)細胞、淋巴細胞減少(shǎo)、血小(xiǎo)<€闆減少(shǎo)明(míng)顯。

2、血生(shēng)化(huà)：肝酶、心肌酶、乳酸脫氫酶、肌紅(hóng)蛋白•≈§‍(bái)、肌鈣蛋白(bái)

血生(shēng)化(huà)是(shì)檢測存在于血液中的(de)各種離(lí"§>•)子(zǐ)、糖類、脂類、蛋白(bái)質以及各種酶、激素和(hé)機(j ♦ī)體(tǐ)的(de)多(duō)種代謝(xiè)産物(wù)的(de)含量，可γ¥σ≤(kě)以為(wèi)醫(yī)生(shēng)提供診斷與治療依據，并能&→β±(néng)幫助臨床确定病情、監測治療效果。±₩©₽

NCOVID19肺炎部分(fēn)患者出現(xiàn)肝♠φ 酶、心肌酶、乳酸脫氫酶、血沉和(hé)肌紅(hóng)蛋白(bái)增高(gāo)，部$÷₽♠分(fēn)危重者可(kě)見(jiàn)肌鈣蛋白♠ε(bái)增高(gāo)。

3、其他(tā)檢測項目：C反應蛋白(bái)（CRP）、降鈣素原（PCT←£）、D-二聚體(tǐ)、血沉、凝血像、血氣分(fēn)析、乳酸等

針對(duì)感染性疾病臨床上(shàng)常采用(→™↓yòng)各種針對(duì)性的(de)檢測項目進行(xíng)輔助診斷，為(wèi)醫(yī)γ§生(shēng)提供診斷與治療依據。

CRP和(hé)PCT的(de)檢測對(duì)鑒别是(shì)否合并肺部的(¶☆de)細菌感染有(yǒu)一(yī)定價值，多(duō)數(shù)NCOVID19患者✔∑CRP和(hé)血沉升高(gāo)，重症患者D-二聚體(tǐ)明(míng)顯升高(gāo)，同≈"™時(shí)出現(xiàn)凝血功能(néng)的(de)障礙，外(wài)周血管的(de)微(±λ↓±wēi)血栓形成。此外(wài)，血氣分(fēn)析有(yλβǒu)助于判斷重症患者的(de)氧合情況，結合乳酸的(de)升高(gāπ€o)可(kě)以篩查高(gāo)危的(de)氧合障礙患者

CT醫(yī)學影(yǐng)像檢查

CT是(shì)用(yòng)X線束對(duì)人(rén)體(tǐ)某部一€α‌(yī)定厚度的(de)層面進行(xíng)掃&♥描，由探測器(qì)接收透過該層面的(de)X線，轉變為(wèi)可(kě)↓↓★₽見(jiàn)光(guāng)後，由光(guān↓$ g)電(diàn)轉換變為(wèi)電(diàn)$π≤信号，再經模拟/數(shù)字轉換器(qì)（analog/digitalconverte↑Ω&r）轉為(wèi)數(shù)字，輸入計(jì)算(suàn)機(jī)處理(lǐ♣™)。

新冠病毒CT的(de)影(yǐng)像學表現(xiàn)與很(hěn)多(duō)其他(tā±↔α₩)病毒性肺炎，如(rú)流感、呼吸道(dào)合胞病毒、腺病毒感染等比較類似，很(hěπ←∞§n)難做(zuò)鑒别性診斷。CT（電(diàn)子(zǐ)計(jì)算(suàn)機(☆‌jī)斷層掃描）作(zuò)為(wèi)臨床影(yǐng)像學篩查指标具有(yǒ₹↓&u)重要(yào)價值，另外(wài)無論從(cóng ±δ)早期診斷、鑒别診斷、排除診斷還(hái)是(shì)最終确診♣★等方面都(dōu)還(hái)具有(yǒu)一(yī)定的(de)局限性≤©≠±，更無法替代病原學診斷。因此，目前的(de)←σ₩♠技(jì)術(shù)水(shuǐ)平下(xià)，最終的(de)确診♣α還(hái)是(shì)要(yào)靠試劑盒核酸檢測。

呼吸道(dào)病原學檢測

呼吸道(dào)病原學檢測是(shì)指采用(yòng)醫(yī)學檢測技(jì)λ∑術(shù)手段針對(duì)進入人(rén)體(tǐ)的(de)呼↔   吸道(dào)病原體(tǐ)進行(xíng)檢測，其目的(de)是(shì)确定呼吸道(dào)↑β★>病原體(tǐ)感染的(de)發生(shēng)和(hé)性質，在疾病早期提供恰當的(de)β→≠治療方案，并采取有(yǒu)效的(de)預防措施，防ε∑ '止感染傳播造成的(de)危害。

呼吸道(dào)病原學檢測均為(wèi)病原體(tǐ)的(β de)針對(duì)性檢測，醫(yī)學上(shàng)在使用(yòng)某種針對(duì Ω)性檢測項目做(zuò)臨床診斷時(shí)常用(yòng)敏感性（Sensitivity）和(hé)特異‌σ性（Specificity）來(lái)衡量檢測項目的(de)準确度和(hé)有(yǒu)效性。因此我們在這(zhè)↓σε 裡(lǐ)先把敏感性和(hé)特異性的(de)概念及其影(yǐng)響講清™'楚。

如(rú)圖所示，試驗指各類檢測項目，在評價某種檢測項目鑒别區(qū)分(fēn)病例組（陽性≈¥&病例）和(hé)非病例組（陰性病例）的(γ★de)能(néng)力時(shí)，将病例的(de)真實情況作(zuò)為(wèi)橫坐(z≈δuò)标，檢測項目得(de)出的(de)檢測結果≠"‍作(zuò)為(wèi)縱坐(zuò)标，真實情況與檢測結果一(yī)緻時(shí±π )檢測結果為(wèi)真，不(bù)一(yī)緻時(shí)檢™γ≠φ測結果為(wèi)假。由此引申出敏感性和(hé)特®↑異性等概念如(rú)下(xià)：

A.敏感性（具有(yǒu)該特性的(de)對(duì)象被預知(zhī)的(de)可(kě)δ®π能(néng)性大(dà)小(xiǎo)）=真陽性率=a/a+c；

B.特異性（對(duì)象所具有(yǒu)的(de)特殊屬性的(de)程度）=真陰性率=d/b+d✘↕；

C.漏診率=1-敏感性=c/a+c；

D.誤診率=1-特異性=b/b+d

此外(wài)，最重要(yào)的(de)是(™±shì)可(kě)以借由上(shàng)圖分(fēn)析敏感性與特異性的(de)關系：

A. 高(gāo)敏感性→上(shàng)述a增大(dà✘γβ★)→L線下(xià)移，無限接近(jìn)X軸→c、d越來(lái)越小(xiǎo)，b越 ↓δ來(lái)越大(dà)，即低(dī)漏診率，高(gāo)誤診率和(hé←λΩ)低(dī)特異性（低(dī)真陰性率）。

B. 高(gāo)特異性→上(shàng)述d增大(dà)→L線上(shàng)移，無限接近↔ "(jìn)+∞→a、b越來(lái)越小(xi↑‍ǎo)，c越來(lái)越大(dà)，即高(gāo)漏診率，低(dī)誤診率和(&σhé)低(dī)敏感性（低(dī)真陽性率）。

由此可(kě)見(jiàn)，高(gāo)敏感性與高(gāo)特異性不(bù✔Ω)可(kě)兼得(de)，高(gāo)敏感•↑★₩性則低(dī)特異性，高(gāo)特異性則低(dī)敏感性。可(kě)采α♦♦用(yòng)敏感性高(gāo)與特異性高(gāo)的(deα≥ $)不(bù)同檢測方法相(xiàng)結合的(de)方式提高(gāo)整↑ →ε體(tǐ)檢測的(de)準确度。

接下(xià)來(lái)我們向大(dà)家(jiā)介紹病原學檢β¥測的(de)各種技(jì)術(shù)方法：

1、病毒培養分(fēn)離(lí)與鑒定

病毒培養一(yī)般有(yǒu)細胞培養和(hé↓δγ)雞胚培養（9-11日(rì)齡雞胚）這(zhè)​↓​α兩種方法。從(cóng)呼吸道(dào)标本培養分(fēn)離(lí)出的™↓♠(de)病毒進行(xíng)鑒定常作(zuò)為(wèi)呼吸道(dào)病原體(tǐ)實驗≠→ 室診斷的(de)金(jīn)标準，其敏感性 ↑和(hé)特異性均在90%以上(shàng)，但(dàn)多(du' ↕↕ō)數(shù)病毒培養比較困難，技(jì)術(s→φhù)難度高(gāo)且操作(zuò)複雜(zá)，生(shēng)物"♥¥≠(wù)安全條件(jiàn)要(yào)求≈♠→ 高(gāo)，檢測周期長(cháng)，一(yī)般不(bù)應用(yòng)≈€​于臨床檢測。

國(guó)家(jiā)衛健委發布的(de)《流行(xíng)性感冒診療方案（2019®¶₩®年(nián)版）》指出“從(cóng)呼吸道(dào)标本培養分(fēn)離("♣∏lí)出流感病毒是(shì)流感診斷的(de)金(jīn)标準。但(dπ‍™àn)由于病毒培養周期較長(cháng)，生(shē≠™™ ng)物(wù)安全條件(jiàn)要(yào‌&​ )求高(gāo)，不(bù)建議(yì)應用(yòng)于臨床診療”。無獨有(yǒu)偶，在目前公布的(de)各項新型冠狀病毒2019-nCoV防治₽$$診療指南(nán)中均未把病毒培養分(fēn)離(lí)與鑒定列入病原學檢測項目。

2、病毒抗原檢測

病毒的(de)結構一(yī)般由外(wài)層的(de)衣殼♠↕蛋白(bái)包含病毒核酸物(wù)質組成，♦♣☆±一(yī)般來(lái)說(shuō)病毒的(£$‍de)衣殼蛋白(bái)可(kě)作(zuò)為(wèi)病毒抗原（Vδ↓↑♥irus antigen）通(tōng)過病毒抗原檢測技(j®<ì)術(shù)被檢測到(dào)。病毒£←¶ 抗原檢測技(jì)術(shù)主要(yào)采用(∞εyòng)免疫層析技(jì)術(shù)，利用(yòng)具有(yǒu)高(gāo)度特異的(λ>​ de)單克隆抗體(tǐ)來(lái)識别呼吸道(dΩ✔✔✔ào)标本中的(de)病毒抗原，待測樣本中如(rú)有(yΩ↑∑ǒu)相(xiàng)對(duì)應的(de)抗原，與試劑闆中包被的(de)抗δ&體(tǐ)結合，抗體(tǐ)上(shàng)面标記↔>Ω↑的(de)物(wù)質呈現(xiàn)顔色變化(huà)，出 ♠£π現(xiàn)對(duì)應條帶，通(tōng)過觀察條帶可(kě)以得↑♦α(de)到(dào)相(xiàng)關的(de)檢測結果。抗體λ÷ (tǐ)标記物(wù)一(yī)般為(wèi)膠體(¶↔tǐ)金(jīn)、乳膠顆粒和(hé)量子(zǐ)點熒光(guāng)納米微(wēi)球等材料。≤→≥✔這(zhè)個(gè)方法在臨床應用(yòng)中操作(zuò)簡便，速度快(kuàiγ<™&)，10-15分(fēn)鐘(zhōng)就(jiù)可(kě)φ™→獲得(de)檢測結果，可(kě)以做(zuò)床旁檢測。病毒感染人(rén)體(tǐ)後一(yī"ε')般會(huì)經曆一(yī)段時(shí)間(jiΩ‍αān)的(de)“潛伏”進行(xíng)病毒複制(zhì)，随後病毒大(dà)量排出引發病理(l♠→≤ǐ)反應。病毒抗原檢測标本一(yī)般為(wèi)上(shàng)呼吸道(dào)标本，一(↕∏yī)般采用(yòng)口咽拭子(zǐ)或鼻咽拭子(z₽≠&ǐ)進行(xíng)取樣，在發病初期具有(yǒu)良好(hǎo)的(de)檢測效果，但←✔α(dàn)随病情的(de)發展和(hé)治療其檢測陽性率有(yǒu)所下(xià)降。

目前臨床上(shàng)應用(yòng)最廣泛的(de)病毒抗原快(kuài)速檢測技(jì¥↑‍↑)術(shù)是(shì)針對(duì)流行✔∞✔ε(xíng)性感冒的(de)檢測，全國(guó)有(yσ ǒu)超過10家(jiā)廠(chǎng)家(jiā)可(kě)生(shēng)産針對(←® duì)流感病毒抗原快(kuài)速檢測的(de)試劑。流感抗原檢測的(de)靶标一(yī)✘♦般是(shì)流感病毒NP和(hé)MP蛋白(bái)，可(kě)以确>♦定病毒是(shì)甲型還(hái)是(shì)乙型，但(dàn)無法ε¶$确定病毒的(de)亞型。流感病毒抗原檢測一(yī)般采用(yòng)膠體(tǐ)金(jīn ‌)标記，也(yě)有(yǒu)采用(yòng)熒光(guānπ‍σ>g)标記法進行(xíng)标記的(de)，熒光(guāng)¶$ ∞标記法會(huì)比膠體(tǐ)金(jīn)标記的(de)方法敏感性更高(gāo)，多(​←duō)需相(xiàng)應儀器(qì)，如(rú)熒光(guāng)顯微(wēiα×↓δ)鏡，熒光(guāng)檢測設備。流感病毒抗原檢測試劑的(de)敏感性受到(★₩dào)抗體(tǐ)原料和(hé)标記物(wù)性能(néng)的(de)影(yǐng)響極大(→♠dà)，使不(bù)同廠(chǎng)家(jiā)檢測試劑的>≈'β(de)敏感性跨度較大(dà)，一(yī)般在20%-70" ≥™%之間(jiān)，并且在病毒載量較低(dī)時(shí)無Ω×↔₽法檢測到(dào)目标病毒，檢測陰性不(bù)能(néng)作(zuò∏φ$)為(wèi)排除流感感染的(de)診斷标準，各廠(chǎng)家(jiā)流感抗原∑​δ檢測試劑的(de)特異性一(yī)般在90%以上(shàng®​ )，因此檢測陽性支持診斷。在國(guó)家(jiā)£≤‌®衛健委發布的(de)《流行(xíng)性感冒診療方案（2019年(niáδ☆n)版）》中推薦流感病毒抗原檢測可(kě)作(zuò)為(wèi)确≤₩★•診方法，但(dàn)同時(shí)也(yě)提示其檢測陰性不(bù)≤←"£能(néng)排除流感。抗原檢測方法因其快(kuài)速方便，特異性‌φ≈好(hǎo)，比較容易在各層級醫(yī)院中普及。

反觀針對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV抗原的(de)檢測則尚處↑®‍于前期研發階段，尚無有(yǒu)注冊申報(bào)的(de)産品出來(lái)，究其主要(yβ≈ào)原因應與試劑原材料有(yǒu)關，主要(yào)是(shì)目前尚無法獲得(de)針對(‌♣​duì)新型冠狀病毒2019-nCoV抗原蛋白(bái)特異性高(gāo)的(de)單克σφ§•隆抗體(tǐ)。盡管早在2020年(nián)1月(yuè)✘α∏底就(jiù)有(yǒu)公司聲稱獲得(de)了(le)新型冠狀病毒2019-Ω≈nCoV抗原蛋白(bái)的(de)抗體(tǐ)，至今也(yě)有(yǒu)數(shù)家÷→(jiā)公司宣布可(kě)對(duì)外(§‌₹→wài)提供相(xiàng)應抗體(tǐ)，但(dàn)通(tōng)過查詢 ↕相(xiàng)關信息并進行(xíng)深入分(fēn)析可(kě)得( ↑λde)知(zhī)目前可(kě)提供的(de)新型冠狀病毒2019-nCα×αoV抗原蛋白(bái)抗體(tǐ)應均為(wèi)通(tō♣αng)過動物(wù)免疫獲得(de)的(de)多(duō)抗而并非單克隆抗體(tǐ)，如(rú→α‌)采用(yòng)多(duō)抗作(zuò)為(wèα★↕i)原料生(shēng)産新型冠狀病毒2019-nCoV抗原檢測試劑則會(huì)對(du↔→±ì)試劑檢測結果造成極大(dà)影(yǐng)響。即♠¶★使經過一(yī)段時(shí)間(jiān)的(de)研發和£<₩(hé)生(shēng)産有(yǒu)公司可(kě)提供針¶εδ‍對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV抗原蛋白(bái)的(de)單克隆抗體(tǐ)，其作(z×£Ω&uò)為(wèi)原材料加入到(dào)抗原檢測試劑中的(de)效果仍需要(yào)大(dà)♥>σ×批臨床實驗數(shù)據的(de)驗證。然而流感病毒在全球範圍內(nè​Ω♠​i)肆虐百年(nián)，并且每年(nián)有(y₹♠ǒu)周期性的(de)流行(xíng)，國∑¶←(guó)內(nèi)外(wài)能(néng)夠生(s‌≠♠¶hēng)産流感病毒抗原單克隆抗體(tǐ)的(de)廠(chǎnγ ​∑g)家(jiā)超過百家(jiā)，因此生(shēn♥ Ωg)産抗原檢測試劑的(de)廠(chǎng)家(jiā)可(kě)以獲φ §÷得(de)性能(néng)較好(hǎo)的(de)單克隆抗體(tǐ)原材料進行(xíng)研發和(≥∑★"hé)生(shēng)産，最終獲得(de)流感病毒抗原檢測試劑。綜上(shàng)λα所述，新型冠狀病毒2019-nCoV抗原檢測試劑尚有(yǒu)很♦↔∑(hěn)長(cháng)的(de)一(yī)段路(lù)要(yào)走，但(dàn)一(y™★ī)旦試劑研發成功并獲得(de)國(guó)家(jiā)藥監局的(de↕↕<)注冊審批則完全可(kě)以快(kuài)速應用(yòng)到(dào)臨δ σ床，以其操作(zuò)簡單、檢測速度快(kuài)、特異性高(gāo)、易普及等¥¶優點會(huì)快(kuài)速被各層級醫(yī)療機(jī)構廣泛接∏₩受。

3、病毒抗體(tǐ)檢測

抗體(tǐ)（Antibody）是(shì)指機(jī)體(tǐ)由于抗原的(de)刺激§÷而産生(shēng)的(de)具有(yǒu)保護作(zuò)用(yòng)的(de)蛋白(b♣♦≤‌ái)質，是(shì)一(yī)種由漿細胞（效應B細胞）分(fēn)泌，被免疫β¥←系統用(yòng)來(lái)鑒别與中和(hé)外(wài)來(lái)物(wù)質如(r ≤ú)細菌、病毒等的(de)大(dà)型Y形蛋白(bái)質，僅被發現(xiàn)存在于脊椎動物(‌≤​wù)的(de)血液等體(tǐ)液中，及其B細"÷≠胞的(de)細胞膜表面。抗體(tǐ)是(shì)一(yī)類≠α→©能(néng)與抗原特異性結合的(de)免疫球蛋白(bái)(immu σ noglobulin，Ig)，由四條多(duō)肽鏈組成，各肽鏈之間(jiān ★•)由數(shù)量不(bù)等的(de)鏈&∞↓間(jiān)二硫鍵連接，大(dà)緻可✔→&(kě)分(fēn)為(wèi)5類，即IgM、IgD、IgG、IgA✔€≈和(hé)IgE。人(rén)體(tǐ)在接觸外(wài)來(lái)抗原（Anti≤•$gen）的(de)時(shí)候，最早産生(sh© '£ēng)的(de)抗體(tǐ)是(shì)I$€©gM，是(shì)由B細胞表面受體(tǐ)直©"λ接分(fēn)泌，産生(shēng)IgMσ€∏→的(de)B細胞進入淋巴結，在發生(shēn∏<←g)中心接受T細胞和(hé)抗原提呈細胞的(de)刺激，進一(yī)步成熟，分(fēn)化(÷§huà)為(wèi)漿細胞，大(dà)量産生(shēng)IgG。

目前臨床上(shàng)針對(duì)抗體<§≈(tǐ)的(de)檢測一(yī)般也(yě)采用(yòng)前面抗原檢測中提到(dà‌♠&o)的(de)免疫層析技(jì)術(shù)，但(dàn)檢測試劑原料與抗☆×原檢測不(bù)同，抗體(tǐ)檢測是(shì)利用(yòng)病毒抗原蛋白(bái)來(l​α↕∑ái)識别血液标本中的(de)病毒由病毒感染所産生(shēng)的(de)抗體(γ≥φ≠tǐ)，一(yī)般針對(duì)血液中病毒特異性的(de)IgM和(hé)Igδ G進行(xíng)檢測。

IgM是(shì)初次體(tǐ)液免疫應答(dá)中最早出現(xiàn)的(de)抗體(t &ǐ)，IgG是(shì)血清和(hé)體☆‍(tǐ)液中含量最高(gāo)的(de)抗體(tǐ)，占血≤₹∏清總Ig的(de)75%～80%，其親和(ᙧσhé)力高(gāo)，在體(tǐ)內(nèi)分(fēn)布廣泛。抗體(tǐε∏ )檢測的(de)方法，之前應用(yòng)的(de)≠$<'比較多(duō)，但(dàn)随著(zhe)我們認知(zhī)的δ♠β(de)逐漸提高(gāo)，在2019年(ni×✘β¥án)的(de)流感診療方案中已經很(hěn)明(míng)确流感®¶÷病毒IgG 抗體(tǐ)水(shuǐ)平恢複期比"λ≥急性期呈4 倍或以上(shàng)升高(gāo)僅有(yǒu)回顧性診斷意義，無法用(yòng∑×"∏)于病毒感染的(de)診斷，而IgM 抗體(tǐ)檢測敏感性較低(dī)，不(bù)建議(yì)常§∏←​規使用(yòng)。其實不(bù)僅是(shì)不(♦→bù)适合流感的(de)診斷，大(dà)多(duō)數(shù)呼吸道(dào↓♥)病毒都(dōu)不(bù)需要(yào)這(zhè)種抗體(tǐ)檢測方法，其©​主要(yào)原因是(shì)抗體(tǐ)一(yī÷>δ)般在患者恢複期才大(dà)量産生(shēng)，時(shí)效性差，無法作(zu​ ≥≤ò)為(wèi)病毒感染的(de)早期診斷，對(duì)傳染性極高(gāo≈↔)新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)診斷和(hé)防控毫無意義。因此，目前各項新型冠狀病毒2019-nCoV防治診療指南(nán)中均未把病毒抗體(γ§δtǐ)檢測列入病原學檢測項目。

4、病毒核酸檢測

所有(yǒu)生(shēng)物(wù)除朊Ω≈病毒外(wài)都(dōu)含有(yǒu)核酸，核σφ↓酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和(hé)核糖核酸（RNA），新型冠狀病毒是(shì)一(yī​↔)種僅含有(yǒu)RNA的(de)病毒，病毒>±∏€中特異性RNA序列是(shì)區(qū)≤₩±§分(fēn)該病毒與其它病原體(tǐ)的(de)标志(zhì)物(wù)。新型 >冠狀病毒2019-nCoV出現(xiàn)後，我國(guó)科(kē)≈& ₹學家(jiā)在極短(duǎn)的(de)時(shí)間(jiān)裡(lǐ)完成了(le σΩ₽)對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV全基因組序列的(de)解析，并通(tγ✔ ♦ōng)過與其它物(wù)種的(de)基因組序列對(duì)比，→$∞±發現(xiàn)了(le)新型冠狀病毒2019-∑ε₽nCoV中的(de)特異核酸序列。臨床實驗室檢測過程中，如(r‌∏πú)果能(néng)在患者樣本中檢測到(dàoπ ±γ)新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)特 ε異核酸序列，應提示該患者可(kě)能(néng)被新型冠狀病毒201&↓↔9-nCoV感染。

檢測新型冠狀病毒2019-nCoV特異核酸序列的(de)方法最常見(jiàn)的(de)是(↕×±shì)熒光(guāng)定量PCR（聚合酶鏈式反應'Ωλ）。因PCR反應模闆僅為(wèi)DNA，而新型冠狀病毒2019-nCoV為(wèi)R≠φNA病毒，因此在進行(xíng)PCR反應前，應将新型冠φ✘γ狀病毒核酸（RNA）逆轉錄為(wèi)DNA。在PCR反應體(tǐ)系中，包含一(yī)對♦∑(duì)特異性引物(wù)以及一(yī)個(gè)探針，該探針為(wèi)一(÷©ε♣yī)段特異性寡核苷酸序列，兩端分(fēn)别标記了(le)報(bào)☆®φ告熒光(guāng)基團和(hé)淬滅熒光(guāng)基團。探針完→™₹☆整時(shí)，報(bào)告基團發射的(de)熒光(guāng)信₩↑☆&号被淬滅基團吸收；如(rú)反應體(tǐ)系存在靶序列，PCR反應時(shí)≠☆ε探針與模闆結合，DNA聚合酶沿模闆利用(yònσ≈★©g)酶的(de)外(wài)切酶活性将探♣®↑™針酶切降解，報(bào)告基團與淬滅基團分(fēn)離(l✔♥↑í)，發出熒光(guāng)。每擴增一(yī)條DNA鏈，就♠β≈(jiù)有(yǒu)一(yī)個(gè)熒光(guāng)分(fēn)子(zǐ)産生(¥←☆shēng)。熒光(guāng)定量PCR儀能(néng)夠監測出熒光(guāng)πβ‌>到(dào)達預先設定阈值的(de)循環數(shù)（Ct值）與病毒核酸濃度有(yǒ&‍u)關，病毒核酸濃度越高(gāo)，Ct值越小(xiǎo)。δ←£

核酸檢測是(shì)分(fēn)子(zǐ)診斷的(de)主要(y✔←"‌ào)技(jì)術(shù)手段，是(sh<&ì)當前臨床病原微(wēi)生(shēng"→©≠)物(wù)診斷技(jì)術(shù)的(de)• 前沿，是(shì)肺部感染診斷技(jì)術(₹€shù)的(de)發展方向，該方法的(de)&✔↕敏感性超過90%，特異性更是(shì)接近(jìn)10↕€¥©0%，目前已經在臨床上(shàng)被廣δ≥↑泛用(yòng)于各種呼吸道(dào)病原體(tǐ)的(de)确診檢測。國(guóλβ )家(jiā)衛健委發布的(de)《流行(β☆λ xíng)性感冒診療方案（2019年(nián)版）》£‍​中指出“：病毒核酸檢測的(de)敏感性和(hé)特異性很(hěn≈≈‌)高(gāo)，且能(néng)區(qū)分(fēγ £n)病毒類型和(hé)亞型。目前主要(yào)包括實時(shí)熒光(guā≤©<₩ng)定量PCR 和(hé)快(kuài)速多(duō)重PCR。熒光(guāng)定∞±£量PCR 法可(kě)檢測呼吸道(dào)标本（鼻拭子(zǐ)、咽拭子(zǐ)、<✔鼻咽或氣管抽取物(wù)、痰）中的(de)流感病毒核酸，★©≥©且可(kě)區(qū)分(fēn)流感病毒亞型。” 在目前公布的(de)各項新型冠狀病毒2019-σ∑nCoV防治診療指南(nán)中均把呼吸道(dào)或血液标本中的(de)新型冠狀病毒2019->€nCoV核酸檢測陽性定為(wèi)确診方法。

但(dàn)随著(zhe)新型冠狀病毒2019-nCoV核≈✔酸檢測試劑的(de)廣泛投入使用(yòng)，越來(lái)越多( σελduō)的(de)問(wèn)題暴露出來(lái)，其中最引人(réσΩn)注意的(de)是(shì)病毒核酸檢測出現(xiàn)過多(duō)假陰性的(de)問(w×≠↑&èn)題，敏感性超過90%核酸檢測試劑為(wèi)何存↑↕‍在較多(duō)的(de)假陰性結果，我們針對(duì)此問(wèn)題也(yα≤'ě)整理(lǐ)了(le)相(xiàng)關資料 <™‌并在此進行(xíng)詳細描述。總體(tǐ)上(s←✔hàng)講核酸檢測的(de)結果受到(dà™‌o)疾病發展過程、标本采集、标本保存與運¶ 輸、核酸提取、擴增體(tǐ)系、檢測操作(zuò)環境以及人(rén)員(yuán)操作(zu≈ε₽€ò)等因素的(de)影(yǐng)響。

5、病原學檢測方法的(de)選擇：

由于新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)臨床研究有(yǒu)←λ£≈限，因此我們參考流感檢測時(shí)間(jiān)窗(ch↑δφλuāng)口明(míng)确當前新冠病毒2019-nCoV的(de)實驗室檢測方法∏ ✔的(de)選擇。根據流感檢測的(de)時(shí)間(jiān)窗(chuāng)口™$¥↓我們可(kě)以看(kàn)到(dào)比如(rú)P₩λαOCT、熒光(guāng)檢測技(jì)術(shù)、病毒分(fēn)離(€✔δlí)培養法、RT-PCR、抗體(tǐ)檢測等方法，它₹→σ≈們檢測的(de)時(shí)間(jiān)和(hé)時(shí)間(jiā±↔​ n)段有(yǒu)所不(bù)同，病毒抗原檢測（以POCT或熒$ ‍光(guāng)檢測技(jì)術(shù)開(kāi)展），病毒分(fēn)離(lí)培養法₽¶∞和(hé)核酸檢測（以RT-PCR技(jì)£‌術(shù)開(kāi)展）的(de)檢測窗(chuāng)口靠前，抗體(tǐ)檢測滞後。呼吸道←® ±(dào)病毒診斷做(zuò)抗體(tǐ)檢測或者培養在臨床診斷中價值不(bù)高(gāo)，前者×β影(yǐng)響因素太多(duō)（如(rú)産生("​$shēng)抗體(tǐ)的(de)時(shí)間(jiān↕₹>®)窗(chuāng)較長(cháng)，受人(rén)體(tǐ)自(zì)身(shēn)免疫狀≠$≈況影(yǐng)響較大(dà)），後者很(hěn)難滿足即時(shí)檢測的(d∏βπe)需求。因此在各項指南(nán)和(hé)共識中指≤≥出目前臨床上(shàng)針對(duì)流感病毒的(de)病原學檢測集中于抗原檢測和(hé)€±核酸檢測兩項，而針對(duì)新型冠狀病毒2019-nCoV的(de)病原學檢測僅限于核酸¥>檢測。

總結

針對(duì)上(shàng)文(wén)論述，我們總結了(le)不(bù)同方法學的(©Ω↔de)差異：

中華人(rén)民(mín)共和(hé)國(guó)國(g" uó)家(jiā)衛生(shēng)健康委員(γδ≈×yuán)會(huì)發布的(de)《新型冠狀病毒感染的(de)肺炎診療方案（試行(♥€∞βxíng)第五版修正版）》、《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第四版）》∞ 、《WS 286-2008 傳染性非典型肺炎診斷标準》、《流行(xíng)性感冒診療方案（2019年(nián)版）》

武漢大(dà)學中南(nán)醫(yī)院新型冠狀病毒感染的(de↕‌£)肺炎防治課題組發布的(de)《新型冠狀病毒(2019-nCoV)感染的(de)肺炎診療快(kuài)速建議≠♠¥(yì)指南(nán)（标準版）》

北(běi)京協和(hé)醫(yī)院發布的(de)《關于“新型冠狀病毒感染的(de)肺炎”診療建議(y ≤ì)方案（V2.0）》

中華醫(yī)學會(huì)兒(ér)科(kē)學分(fēn)會(huì)呼吸>÷學組呼吸道(dào)感染協作(zuò)組發布的(α≠≈₩de)《兒(ér)童呼吸道(dào)感染微(wēi)λ♦生(shēng)物(wù)檢驗标本采集轉≠©✔運與檢測建議(yì)（病毒篇）》